سنتز، شناسایی کمپلکسهای جدید دارویی از گالیم، قلع و تیتانیم و مطالعات کلینیکی تعدادی از آنها در درمان برخی رده های سلولهای سرطانی
سرطان كه همچنین با نامهای تومور بدخیم یا نئوپلاسم بدخیم نیز یاد میشود، گروهی از بیماریها را گویند كه شامل رشد غیرطبیعی سلولها با قابلیت هجوم و پخششدن به سایر قسمتهای بدن میباشند. راههای بسیاری به منظور درمان سرطان وجود دارد، كه از جمله میتوان به جراحی، شیمیدرمانی، پرتودرمانی، هورموندرمانی، درمان هدفمند و مراقبت تسکینی اشاره نمود. اینكه کدام درمان استفاده میشود بستگی به نوع، محل و درجه سرطان و همچنین به میزان سلامتی و خواستههای فرد، بستگی دارد. داروهای ضدسرطان پایه فلزی جزء ترکیباتی هستند که میتوانند کاندیدهای مناسبی برای شیمی درمانی باشند. مطالعات قبلی نشان میدهند که این تركیبات عوامل قدرتمندی در القاء آپوپتوز در برابر ردههای سلولی مختلف میباشند.
در این مطالعه، اثرات كمپلكسهایی از گالیم، قلع و تیتانیم که خود این فلزات به تنهایی خاصیت بیولوژیکی دارند و همچنین لیگاندهای انتخاب شده در این پایان نامه یعنی مالتول و دفریپرون نیز که ترکیباتی طبیعی و خوراکی هستند و خود به تنهایی خاصیت ضد سرطانی دارند، روی تكثیر ردههای سلولیHeLa (کارسینومای تخمدان انسانی)، MCF-7 (سرطان سینه انسانی)، HT-29 (سرطان روده بزرگ انسان)، K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) و Neuro-2a (نوروبلاستوما موشی) با آزمون MTT در مقایسه با سیس پلاتین بهعنوان استاندارد، مورد بررسی قرارگرفت. همچنین بهمنظور اینكه مطالعه كنیم به چه شكلی كمپلكس مورد نظر، مرگ سلولی (نكروز یا آپوپتوز) ایجاد میكند، مطالعات فلوسایتومتری بر روی این تركیبات صورت گرفت.
واژههای کلیدی: گالیم، قلع، تیتانیم، آپوپتوز، آزمون MTT، ضدسرطان
فهرست مطالب
فصل 1: داروهای ضدسرطان پایه فلزی گالیم، قلع و تیتانیم
1-1 سرطان. 1
1-1-1 خصوصیات سلول طبیعی.. 1
1-1-2 خصوصیات سلول غیرطبیعی.. 2
1-1-3 پاتوفیزیولوژی سرطان. 3
1-1-4 تئوری پیدایش سرطان. 3
1-1-5 درجهبندی و مرحلهبندی تومورها4
1-2 درمان سرطان. 6
1-3 اپیدمیولوژی سرطان. 7
1-4 الگوهای رشد و تکثیر غیرطبیعی.. 8
1-4-1 الگوهای رشد غیرسرطانی.. 8
1-4-2 الگوهای رشد سرطانی.. 9
1-5 راههای گسترش نئوپلاسم. 9
1-5-1 تهاجم. 9
1-5-2 متاستاز. 10
1-6 کارسینوژن. 11
1-6-1 اکسیداسیون. 12
1-6-2 آنتی اکسیدانها13
1-7 شیمی درمانی.. 13
1-7-1 انواع شیمی درمانی.. 15
1-7-2 اصول شیمی درمانی.. 15
1-7-3 اهداف شیمی درمانی.. 16
1-7-4 اهداف اصلی شیمی درمانی.. 17
1-7-5 نحوهی اجرای شیمی درمانی.. 17
1-7-6 عوارض ناشی از شیمی درمانی.. 17
1-8 کمپلکسهای پایه فلزی.. 18
1-8-1 تیتانیم. 18
1-8-2 گالیم. 23
1-8-3 قلع. 27
فصل 2: بخش آزمایشگاهی
2-1 دستگاههای مورد استفاده32
2-2 مواد مورد استفاده32
2-3 سنتز ترکیبات مورد مطالعه. 33
2-3-1 سنتزکمپلکس [تریس (3-هیدروکسی-2-متیل–4-هیدروژن-پیران–4- اوناتو) گالیم (III)] (1):33
2-3-2 سنتزکمپلکس [تریس (3-هیدروکسی-1و2–دیمتیل-4-پیریدینوناتو) گالیم (III)] (2):34
2-3-3 سنتزکمپلکس [بیس (3-هیدروکسی-2-متیل-4-هیدروژن-پیران–4 – اوناتو) قلع (II)] (3):34
2-3-4 سنتزکمپلکس [بیس(3-هیدروکسی-1و2–دیمتیل-پیریدین-4- اون) قلع (II)](4):34
2-3-5 سنتز کمپلکس [تتراکیس (دی آکسو-بیس (3-هیدروکسی-2-متیل–4-هیدروژن-پیران4- اوناتو)) تیتانیم(IV)] (5) :35
2-4 ردههای سلولی و محیط کشت سلول. 35
2-4-1 محیط کشت.. 36
2-4-2 نگهداری و کشت سلولها36
2-4-2-1 پاساژ دادن سلولها36
2-4-2-2 فریز کردن سلولها37
2-4-2-3 دفریز کردن سلولها37
2-4-2-4 انتخاب و جایگذاری سلولهای سرطانی مختلف در پلیت.. 38
2-5 بررسی اثرات سمیت سلولی به روش MTT. 39
2-5-1 اندازهگیری IC5040
2-6 ارزیابی آپوپتوز برای کمپلکس بوسیلهی فلوسایتومتری.. 41
فصل3: نتایج و بحث
3-1 مقدمه. 44
3-2 شناسایی کمپلکس (1)45
3-2-1 دادههای تجزیهی عنصری کمپلکس (1)46
3-2-2 بررسی طیف زیر قرمز کمپلکس (1)46
3-2-3 بررسی ساختار کریستالی کمپلکس (1) با پراش پرتوی X. 46
3-2-4 بررسی اثرات بیولوژیكی كمپلكس (1)47
3-2-5 تعیین دوز مهاری (IC50) كمپلكس (1) بر روی ردههای سلول سرطانی به روش MTT. 47
3-2-6 نتایج حاصل از بررسی آپوپتوز برای کمپلکس (1) بوسیلهی آزمون فلوسایتومتری.. 48
3-3 شناسایی کمپلکس (2)50
3-3-1 دادههای تجزیهی عنصری کمپلکس (2)50
3-3-2 بررسی طیف زیر قرمز کمپلکس (2)50
3-3-3 بررسی ساختار کریستالی کمپلکس (2) با پراش پرتوی X. 51
3-3-4 بررسی اثرات بیولوژیكی كمپلكس (2)51
3-3-5 تعیین دوز مهاری (IC50) كمپلكس (2) بر روی ردههای سلول سرطانی به روش MTT. 52
3-3-6 نتایج حاصل از بررسی آپوپتوز برای کمپلکس (2) بوسیلهی آزمون فلوسایتومتری.. 53
3-4 شناسایی کمپلکس (3)54
3-4-1 دادههای تجزیهی عنصری کمپلکس (3)54
3-4-2 بررسی طیف زیر قرمز کمپلکس (3)55
3-4-3 بررسی ساختار کریستالی کمپلکس (3) با پراش پرتوی X. 55
3-4-4 بررسی اثرات بیولوژیكی كمپلكس (3)56
3-4-5 تعیین دوز مهاری (IC50) كمپلكس (3) بر روی ردههای سلول سرطانی به روش MTT. 56
3-4-6 نتایج حاصل از بررسی آپوپتوز برای کمپلکس (3) بوسیلهی آزمون فلوسایتومتری.. 57
3-5 شناسایی کمپلکس (4)59
3-5-1 دادههای تجزیهی عنصری کمپلکس (4)59
3-5-2 بررسی طیف زیر قرمز کمپلکس (4)59
3-5-3 بررسی اثرات بیولوژیكی كمپلكس (4)60
3-5-4 تعیین دوز مهاری (IC50)كمپلكس (4) بر روی ردههای سلول سرطانی به روش MTT. 61
3-5-5 نتایج حاصل از بررسی آپوپتوز برای کمپلکس (4) بوسیلهی آزمون فلوسایتومتری.. 62
3-6 شناسایی کمپلکس (5)63
3-6-1 دادههای تجزیه عنصری کمپلکس (5)64
3-6-2 بررسی طیف زیر قرمز کمپلکس (5)64
3-6-3 بررسی ساختار کریستالی کمپلکس (5) با پراش پرتوی X. 64
3-6-4 بررسی اثرات بیولوژیكی كمپلكس (5)65
3-6-5 تعیین دوز مهاری (IC50) كمپلكس (5) بر روی ردههای سلول سرطانی به روش MTT. 65
فصل4: بحث و نتیجهگیری
4-1نتیجهگیری. 68
مراجع71
پیوستها
پیوست 1. 76
پیوست 2. 78
پیوست 3. 80
پیوست 4. 82
پیوست 5. 84
فهرست اشكال
شکل 1-1: سیکل سلولی.. 2
شکل 1-2: کمپلکسهای تیتانیم. 20
شکل 1-3: تیتانیم سالان. 21
شکل1-4: تیتانوسنy. 22
شکل1-5: کمپلکس گالیم کینولین. 25
شکل1-6: کمپلکس گالیم مالتول. 27
شکل 1-7: تیوسمی کاربازون. 30
شکل 1-8: مشتقات سیکلو پنتا دیانیل. 30
شکل2-1: واکنش تبدیل MTTبه فورمازان. 40
شكل 3-1: ساختار کمپلکس [تریس (3-هیدروکسی-2-متیل–4-هیدروژن-پیران–4-اوناتو) گالیم (III)] (1)45
شکل 3-2: دیاگرام ORTEPکمپلکس [تریس (3-هیدروکسی-2-متیل–4-هیدروژن-پیران–4-اوناتو) گالیم (III)] (1)47
شکل 3-3: دیاگرام فلوسایتومتری برای كمپلكس (1)، سیس پلاتین و گروه كنترل.49
شکل 3-4: ساختار کمپلکس [تریس (3-هیدروکسی-1و2–دیمتیل-4-پیریدینوناتو) گالیم (III)] (2)50
شکل 3-5: دیاگرام ORTEPکمپلکس [تریس (3-هیدروکسی-1و2–دیمتیل-4-پیریدینوناتو) گالیم (III)] (2)51
شکل 3-6: دیاگرام فلوسایتومتری برای كمپلكس (2)، سیس پلاتین و گروه كنترل.54
شكل 3-7: ساختار کمپلکس [بیس (3-هیدروکسی-2-متیل-4-هیدروژن-پیران–4–اوناتو) قلع(II)] (3)55
شکل 3-8: دیاگرام ORTEPکمپلکس [بیس (3-هیدروکسی-2-متیل-4-هیدروژن-پیران–4–اوناتو) قلع (II)] (3)56
شکل 3-9: دیاگرام فلوسایتومتری برای كمپلكس (3)، سیس پلاتین و گروه كنترل.58
شكل 3-10: ساختار کمپلکس [بیس (3-هیدروکسی-1و2–دیمتیل-پیریدین-4-اون) قلع (II)](4)59
شکل 3-11: دیاگرام فلوسایتومتری برای كمپلكس (4)، سیس پلاتین و گروه كنترل.63
شكل 3-12: ساختار کمپلکس [تتراکیس (دیآکسو-بیس (3-هیدروکسی-2-متیل–4-هیدروژن-پیران–4-اوناتو)) تیتانیم(IV)] (5)63
شکل 3-13: دیاگرام ORTEPکمپلکس [تتراکیس (دیآکسو-بیس (3-هیدروکسی-2-متیل–4-هیدروژن-پیران–4-اوناتو)) تیتانیم (IV)] (5)65
شکل 1: دادههای تجزیه عنصری کمپلکس (1)76
شکل 2: طیف IRکمپلکس (1)77
شکل 1: دادههای تجزیه عنصری کمپلکس (2)78
شکل 2: طیفFT-IRکمپلکس (2)79
شکل 1: دادههای تجزیه عنصری کمپلکس (3) 85
شکل 2: طیف IRکمپلکس (3)81
شکل 1: دادههای تجزیه عنصری کمپلکس (4)82
شکل 2: طیفFT-IRکمپلکس (4)83
شکل1: دادههای تجزیه عنصری کمپلکس (5)89
شکل2: طیفFT-IRکمپلکس (5)85
فهرست جداول:
جدول 1- 1: تقسیمبندی ضایعات بدخیمی بر اساس درجهبندی و مرحلهبندی.. 5
جدول 1-2: سیستم طبقهبندی TNM.. 6
جدول 1-3: مقایسه IC50ترکیبهای 1 و 2 و 3. 29
جدول 3-1: فعالیت ضدسرطانی کمپلکس مورد مطالعه در مقابل ردههای سلولی HeLa(کارسینومای تخمدان انسانی)، MCF-7(سرطان سینه انسانی)، HT-29 (سرطان روده بزرگ انسانی)، K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) و Neuro-2a(نوروبلاستوما موشی) پس از 48 ساعت تیمار پیوسته. 48
جدول 3-2: درصد مرگ سلولی مشاهده شده بهوسیلهی آزمون فلوسایتومتری بر روی ردهی سلولی HT-29(سرطان روده بزرگ انسانی)، پس از 24 ساعت تیمار پیوسته. 49
جدول 3-3: فعالیت ضدسرطانی کمپلکس مورد مطالعه در مقابل ردههای سلولیHeLa(کارسینومای تخمدان انسانی)، MCF-7(سرطان سینه انسانی)، HT-29(سرطان روده بزرگ انسانی)، K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) و Neuro-2a (نوروبلاستوما موشی) پس از 48 ساعت تیمار پیوسته. 53
جدول 3-4: درصد مرگ سلولی مشاهده شده بهوسیلهی آزمون فلوسایتومتری بر روی ردهی سلولی HT-29 (سرطان روده بزرگ انسانی)، پس از 24 ساعت تیمار پیوسته. 54
جدول 3-5: فعالیت ضدسرطانی کمپلکس مورد مطالعه در مقابل ردههای سلولی HeLa(کارسینومای تخمدان انسانی)، MCF-7(سرطان سینه انسانی)، HT-29 (سرطان روده بزرگ انسانی)، K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) و Neuro-2a (نوروبلاستوما موشی) پس از 48 ساعت تیمار پیوسته. 57
جدول 3-6: درصد مرگ سلولی مشاهده شده بهوسیلهی آزمون فلوسایتومتری بر روی ردهی سلولی K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) پس از 24 ساعت تیمار پیوسته. 58
جدول 3-7: فعالیت ضدسرطانی کمپلکس مورد مطالعه در مقابل ردههای سلولی HeLa(کارسینومای تخمدان انسانی)، MCF-7 (سرطان سینه انسانی)، HT-29 (سرطان روده بزرگ انسانی)، K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) و Neuro-2a(نوروبلاستوما موشی) پس از 48 ساعت تیمار پیوسته. 61
جدول 3-8: درصد مرگ سلولی مشاهده شده به وسیلهی آزمون فلوسایتومتری بر روی ردهی سلولی K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) پس از 24 ساعت تیمار پیوسته. 62
جدول 3-9: فعالیت ضدسرطانی کمپلکس مورد مطالعه در مقابل ردههای سلولی HeLa(کارسینومای تخمدان انسانی)، MCF-7 (سرطان سینه انسانی)، HT-29 (سرطان روده بزرگ انسانی)، K-562 (سرطان سلولهای میلوییدی خون انسان) و Neuro-2a (نوروبلاستوما موشی) پس از 48 ساعت تیمار پیوسته. 66
چطور این فایل رو دانلود کنم؟
برای دانلود فایل کافیه روی دکمه "خرید و دانلود" کلیک کنید تا صفحه "پیش فاکتور خرید" برای شما باز بشه و توی این صفحه مشخصات خودتون رو با دقت ثبت کنید و روی دکمه "پرداخت آنلاین" کلیک کنید و بعد از اینکه توی صفحه بانک مشخصات کارت بانکی خودتون رو ثبت کردید و پرداخت انجام شد ، صفحه دانلود فایل باز میشه و می تونید فایل مورد نظر رو همراه با فایل هدیه به راحتی دانلود کنید.
با خرید از شما چه هدیه ای دریافت می کنم؟
توی سایت فایل ناب برای هر خریدار یک فایل هدیه در نظر گرفتیم که بلافاصله بعد از اولین خرید ، این فایل رو هم می تونید به راحتی دانلود کنید. لینک دانلود این فایل به همراه لینک دانلود فایل خریداری شده ، بعد از پرداخت به شما نمایش داده میشه. عنوان فایل هدیه "چطور محصولات آموزشی پرفروش بسازیم" هست که قیمتش 29000 تومنه و بصورت رایگان در اختیار شما قرار داده میشه.
آیا فایل رو بلافاصله بعد از خرید تحویل می گیرم؟
بله. بلافاصله بعد از پرداخت آنلاین ، صفحه دانلود فایل برای شما نمایش داده میشه و می تونید اون فایل رو به راحتی دانلود کنید.
هزینه رو پرداخت کردم اما نمی تونم دانلود کنم.
در سایت فایل ناب چند روش پشتیبانی رو برای راحتی شما در نظر گرفتیم تا با سرعت بیشتری به پیام های شما رسیدگی کنیم. برای دریافت سریع فایل می تونید از طریق پشتیبانی آنلاین و یا از طریق شماره 09192682620 در واتساپ با ما در ارتباط باشید و ایمیل و شماره همراهی که در زمان خرید ثبت کردید رو ارسال کنید تا فایل رو برای شما بفرستیم. همچنین می تونید از فرم تماس با ما و یا از طریق تیکت در حساب کاربری خودتون این مشخصات رو برای ما ارسال کنید تا فایل رو به ایمیل شما بفرستیم.
این فایلی که دانلود کردم با توضیحاتی که نوشته بودن فرق داره !
اگه فایل با توضیحات همخوانی نداره کافیه از طریق تیکت این موضوع رو به ما اطلاع بدید. ما فایل رو بررسی میکنیم و یا فایل اصلی رو به ایمیل شما میفرستیم و یا اینکه هزینه ای که پرداخت کردید رو به حسابتون برگشت میزنیم. توضیحات کامل تر در این خصوص رو می تونید توی صفحه "راهنمای خرید و دانلود" مطالعه کنید.
چیکار کنم که موقع خرید و پرداخت آنلاین به مشکل نخورم؟
برای اینکه در زمان پرداخت آنلاین به مشکل برخورد نکنید باید V P N خاموش باشه و از مرورگرهای موزیلا فایرفاکس و کروم استفاده کنید. و ضمنا در صفحه "پیش فاکتور خرید" مشخصات خودتون رو به شکل صحیح وارد کنید. این موضوع رو در نوشتن ایمیل هم در نظر داشته باشید که ایمیلی که فعال هست و بهش دسترسی دارید رو بنویسید. ایمیل صحیح به این شکله filenab.com@gmail.com
نظرت در مورد این محصول چیه؟